Tampon BIS-TRIS CAS 6976-37-0

Este un tampon biologic eficient cu un interval de tamponare eficient al pH-ului de 5,8-7,2 și o valoare pKa de 6,5 (25 grade ). În experimentele biochimice, multe biomolecule, cum ar fi proteinele și acizii nucleici, sunt foarte sensibile la valorile pH-ului și chiar și mici modificări ale pH-ului le pot afecta structura și funcția. BIS-TRIS poate stabiliza valoarea pH-ului soluției în acest interval de pH, oferind un mediu stabil pentru reacțiile biochimice. În procesul de separare și purificare a proteinelor, conformația naturală a proteinei poate fi menținută pentru a preveni denaturarea sau precipitarea din cauza modificărilor pH-ului.

De exemplu, în tehnicile de purificare a proteinelor, cum ar fi cromatografia cu schimb de ioni și cromatografia de afinitate, utilizareaBuffer BIS-TRISpoate asigura că interacțiunea dintre proteine ​​și mediile de cromatografie are loc în condiții stabile de pH, îmbunătățind astfel eficiența și puritatea purificării.

În testele activității enzimatice, activitatea enzimatică depinde adesea de un mediu specific de pH. Valoarea pH-ului sistemului de reacție poate fi controlată cu precizie pentru a permite enzimei să exercite activitate catalitică în condiții optime de pH, măsurând astfel cu exactitate activitatea enzimei. Acest lucru este de mare importanță pentru studierea proprietăților, mecanismelor de acțiune și dezvoltarea preparatelor enzimatice ale enzimelor.

BIS-TRIS are capacitatea de a se coordona cu diverși ioni metalici și de a forma complecși stabili, cum ar fi Zn ² ⁺ - BIS-TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS etc. Acești complecși de ioni metalici joacă un rol important în studiul structurii și funcției de biomolecule ale proteinelor. cofactorii să participe la formarea centrilor activi în proteine. Prin coordonarea BIS-TRIS cu ionii metalici, structura complecșilor de ioni metalici proteici poate fi stabilizată, facilitând utilizarea tehnicilor precum cristalografia cu raze X{-și rezonanța magnetică nucleară (RMN) pentru analiza structurală.

De exemplu, centrii activi ai anumitor enzime care conțin zinc necesită ioni de zinc pentru a-și menține activitatea catalitică, iar complecșii BIS-TRIS Zn ² ⁺ pot oferi un mediu structural stabil pentru aceste enzime, ceea ce ajută la analiza cu precizie a structurilor lor tri-dimensionale.

În cercetarea acidului nucleic, cum ar fi secvențierea ADN-ului, ionii metalici pot fi, de asemenea, implicați în plierea și reglarea funcțională a acizilor nucleici. Coordonarea dintre BIS-TRIS și ionii metalici poate regla mediul local al acizilor nucleici, afectând interacțiunile dintre acizii nucleici și proteine, molecule mici etc., oferind un instrument puternic pentru-cercetarea aprofundată a structurii și funcției acizilor nucleici.

BIS-TRIS are aplicații importante în experimentele de electroforeză a proteinelor. SDS-PAGE (electroforeză în gel de poliacrilamidă cu dodecil sulfat de sodiu) și PAGE nativă (electroforeză în gel de poliacrilamidă nedenaturată) sunt tehnici comune de electroforeză a proteinelor.Buffer BIS-TRISeste adesea folosit pentru prepararea tamponului de electroforeză pentru a menține stabilitatea pH-ului soluției în timpul electroforezei. În SDS-PAGE, proteinele sunt denaturate și încărcate negativ într-un tampon de probă care conține SDS și mercaptoetanol și apoi separate după dimensiunea moleculară în gel de poliacrilamidă.

Poate asigura stabilitatea valorii pH a tamponului de electroforeză, permițând proteinelor să migreze în modul așteptat într-un câmp electric, separând astfel proteinele cu diferite greutăți moleculare și detectând greutățile moleculare relative ale acestora.

În PAGE nativă, proteinele își mențin conformația naturală pentru separarea electroforetică. Utilizarea acestuia poate preveni denaturarea proteinelor din cauza modificărilor pH-ului, poate păstra activitatea naturală și informațiile conformaționale ale proteinelor și poate ajuta la studiul stării naturale și a interacțiunilor proteinelor.

Western blot este o tehnică experimentală importantă utilizată pentru a detecta nivelul de expresie al proteinelor țintă. Tamponul propan Bis Tris este adesea folosit ca tampon de transport de proteine ​​în experimentele de imunoblot.

În timpul transferului de proteine ​​de la gel la membrană, tamponul Bis Tris propan poate menține un mediu stabil de pH, asigurând că proteina este transferată la membrană cu conformația și starea de încărcare corectă. Acest lucru este crucial pentru legarea ulterioară a anticorpilor și detectarea semnalului.

Dacă proteinele suferă denaturare sau modificări conformaționale în timpul procesului de transfer, aceasta poate determina ca anticorpii să nu poată recunoaște cu exactitate proteina țintă, afectând astfel acuratețea rezultatelor experimentale. Prin urmare, tamponul propan Bis Tris joacă un rol crucial în experimentele de imunoblotting, ajutând la îmbunătățirea sensibilității și fiabilității experimentelor.

Cultura celulară este o tehnologie importantă în cercetarea biomedicală, iar valoarea pH-ului mediului de cultură celulară are un impact semnificativ asupra creșterii și metabolismului celular. Tamponul BIS-TRIS propan poate fi utilizat pentru prepararea mediilor de cultură celulară pentru a menține o valoare stabilă a pH-ului în timpul procesului de cultură celulară.

Diferite tipuri de celule au cerințe de pH diferite, dar în general necesită creștere într-un mediu apropiat de pH-ul fiziologic (aproximativ 7,2-7,4).

Tamponul BIS-TRIS propan poate tampona modificările pH-ului mediului de cultură în timpul culturii celulare, poate preveni fluctuațiile pH-ului cauzate de acumularea de produse metabolice, schimbul de gaze și alți factori și poate oferi un mediu de creștere stabil pentru celule. Acest lucru este de mare importanță pentru creșterea normală, proliferarea și expresia funcțională a celulelor, contribuind la îmbunătățirea ratei de succes a culturii celulare și a fiabilității rezultatelor experimentale.

Electroforeza acidului nucleic este o metodă utilizată în mod obișnuit pentru detectarea lungimii și concentrației acizilor nucleici țintă, inclusiv electroforeza ADN și ARN. Potrivit pentru experimentele de electroforeză cu acid nucleic, poate menține stabilitatea pH-ului tamponului de electroforeză.

În electroforeza acidului nucleic, moleculele de acid nucleic migrează sub acțiunea unui câmp electric în funcție de mărimea și proprietățile lor de încărcare.

Poate asigura stabilitatea valorii pH a soluției în timpul electroforezei, permițând moleculelor de acid nucleic să migreze în modul așteptat, separând astfel cu precizie fragmentele de acid nucleic de diferite lungimi și detectând concentrațiile acestora. Acest lucru este de mare importanță pentru cercetări precum clonarea genelor, analiza expresiei genelor și secvențierea acidului nucleic.

BIS-TRIS poate fi folosit și pentru a detecta creatinkinaza. Creatin kinaza este o enzimă importantă care joacă un rol crucial în metabolismul energetic muscular. Determinarea activității sale este de mare importanță pentru diagnosticarea bolilor musculare și evaluarea leziunilor sportive. În experimentul de detectare a creatin kinazei, stabilitatea pH-ului sistemului de reacție poate fi menținută pentru a se asigura că enzima prezintă activitate catalitică în condiții optime de pH. Prin controlul precis al valorii pH-ului, acuratețea și fiabilitatea măsurării activității creatin kinazei pot fi îmbunătățite, oferind un sprijin puternic pentru diagnosticul și cercetarea clinică.

BIS-TRIS joacă, de asemenea, un rol important în cercetarea și aplicarea hemoglobinei. În timpul procesului de separare a hemoglobinei, stabilitatea și activitatea acesteia pot fi menținute pentru a preveni denaturarea sau agregarea din cauza modificărilor pH-ului. Acest lucru este de mare importanță pentru purificarea și cercetarea structurală a hemoglobinei.

BIS-TRIS poate proteja eficient hemoglobina în timpul procesului de liofilizare-. Liofilizarea este o metodă frecvent utilizată pentru conservarea produselor biologice, dar proteinele pot fi deteriorate în timpul procesului de congelare și uscare. Poate oferi un mediu stabil pentru hemoglobină în timpul procesului de liofilizare-, poate reduce denaturarea și inactivarea proteinelor și poate îmbunătăți activitatea și stabilitatea hemoglobinei după liofilizare-.

IEF (electroforeza cu focalizare izoelectrică) și electroforeza pe gel 2-D sunt tehnici comune în cercetarea proteomică, care sunt folosite pentru a separa și analiza amestecuri complexe de proteine. BIS-TRIS poate fi folosit ca electrolit catodic pentru electroforeza pe gel IEF/2-D.

În timpul procesului IEF, proteinele migrează și se concentrează într-un gradient de pH bazat pe punctul lor izoelectric. Catolitul BIS-TRIS poate menține stabilitatea pH-ului tamponului de electroforeză, asigurându-se că proteinele pot migra cu precizie către punctul lor izoelectric în timpul procesului de focalizare izoelectrică. În electroforeza pe gel 2-D, utilizarea deBuffer BIS-TRISajută, de asemenea, la îmbunătățirea efectului de separare și a rezoluției proteinelor, oferind date de{0}}înaltă calitate pentru cercetarea proteomică.