Albastru de tiazolil CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. este unul dintre cei mai experimentați producători și furnizori de thiazolyl blue cas 298-93-1 din China. Bine ați venit la vânzare cu ridicata în vrac albastru de tiazolil de înaltă calitate cas 298-93-1 de vânzare aici din fabrica noastră. Sunt disponibile servicii bune și preț rezonabil.

Albastru de tiazolil, mai cunoscut sub numele de MTT (bromură de 3-(4,5-dimetiltiazol{-2-il)-2,5-difeniltetrazoliu), adăpostește o dualitate fascinantă - este atât un instrument vital în biologia celulară, cât și o ciudățenie chimică cameleonică. Această pulbere cristalină galbenă suferă o metamorfoză uluitoare în celulele vii: reductazele mitocondriale își scindează inelul de tetrazoliu, transformându-l într-un precipitat de formazan violet insolubil - o reacție atât de impresionantă vizual încât a devenit standardul de aur pentru măsurarea viabilității celulare. Cu toate acestea, dincolo de banca de laborator, MTT dezvăluie comportamente mai ezoterice; Structura sa cristalină formează modele de tip „herringbone” la microscopie, în timp ce proprietățile sale redox îi permit să participe la reacții fotochimice exotice atunci când este expus la lungimi de undă specifice de lumină. În mod curios, compusul prezintă un fenomen rar numit „metacromazie” – care apar culori diferite în funcție de concentrație și de mediul molecular – o proprietate exploatată cândva de chimiștii din textile pentru a crea coloranți „inteligenti”. Studii recente au descoperit rolul său neașteptat de inhibitor slab al anumitor enzime ale lanțului respirator, sugerând că acest reactiv de testare omniprezent ar fi influențat în mod subtil procesele metabolice pe care oamenii de știință le folosesc pentru a-l studia. Când sunt dizolvate în solvenți organici, soluțiile MTT prezintă un efect neobișnuit de stingere a fluorescenței care i-a nedumerit pe chimiștii fizici, sugerând interacțiuni intermoleculare complexe care încă așteaptă o explicație completă.

Albastru de tiazolil,Denumirea chimică este bromură de 3- (4,5-dimetil-2-tiazol) -2,5-difeniltetrazoliu, abreviată ca MTT, care este un compus organic important. De când Mosman a raportat pentru prima dată utilizarea colorării MTT pentru a determina creșterea și supraviețuirea celulelor în 1983, MTT a fost aplicat pe scară largă în domenii precum științele vieții, cercetarea medicală și dezvoltarea de medicamente. Următoarea este o explicație detaliată a scopului său:

Aplicație în cercetarea în biologie celulară

 

MTT este una dintre metodele clasice de determinare a proliferării celulare. În timpul culturii celulare, dehidrogenazele precum succinat dehidrogenaza din mitocondriile celulelor vii pot reduce MTT exogen la formazan cristalin insolubil albastru violet, care se depune în celulă. Celulelor moarte le lipsește această capacitate de reducere și, prin urmare, nu produc formazan. Prin dizolvarea formazanului în celule și măsurarea valorii sale de absorbție a luminii la lungimi de undă specifice (cum ar fi 490 nm sau 562 nm) folosind un cititor de test imunoabsorbant legat de enzime-(ELISA), numărul de celule vii poate fi reflectat indirect. Într-un anumit interval de numere de celule, cantitatea de cristale MTT formate este proporțională cu numărul de celule, astfel încât proliferarea celulară poate fi determinată pe baza valorii măsurate a absorbanței (valoarea OD).

Aplicație în cercetarea în biologie celulară

 

MTT poate fi, de asemenea, utilizat pentru a determina toxicitatea medicamentelor sau a altor metode de tratament (cum ar fi iradierea cu radiații) pe celulele cultivate in vitro. Prin compararea valorilor DO ale grupului de tratament și ale grupului de control, se poate evalua efectul medicamentelor sau metodelor de tratament asupra activității celulare. Cu cât valoarea DO este mai mare, cu atât activitatea celulară este mai puternică; Dimpotrivă, indică faptul că cu cât activitatea celulară este mai slabă sau toxicitatea celulară este mai mare. Această metodă are aplicații largi în depistarea medicamentelor, cercetarea toxicologiei și în alte domenii. Deși MTT este utilizat în principal pentru a măsura proliferarea celulară și citotoxicitatea, în unele cazuri, poate fi folosit și pentru a ajuta la studiul apoptozei celulare. În timpul procesului de apoptoză celulară, activitatea enzimatică din interiorul celulei se modifică, ceea ce poate afecta capacitatea de reducere a MTT. Prin compararea diferenței de valori DO dintre celulele apoptotice și celulele normale, apariția apoptozei celulare poate fi determinată preliminar. Cu toate acestea, trebuie remarcat faptul că MTT nu este o metodă specializată pentru detectarea apoptozei celulare, iar rezultatele acesteia trebuie analizate cuprinzător împreună cu alte metode de detectare a apoptozei.

Aplicație în dezvoltarea medicamentelor

 

În procesul de dezvoltare a medicamentelor, testul MTT este o metodă utilizată în mod obișnuit de{0}}depistare a medicamentelor cu randament ridicat. Prin co-incubarea medicamentului de testat cu celule și prin utilizarea testului MTT pentru a măsura modificările activității celulare, moleculele potențiale de medicament active pot fi verificate rapid. Această metodă are avantajele unei operațiuni ușoare, rezultate fiabile și un randament ridicat și are o valoare importantă de aplicare în stadiul incipient al dezvoltării medicamentului. Testul MTT poate fi folosit și pentru a studia mecanismul de acțiune al medicamentelor. Prin compararea modificărilor activității celulare în diferite condiții de tratament medicamentos, impactul medicamentelor asupra proceselor precum proliferarea celulară și apoptoza poate fi determinat preliminar. Prin combinarea altor tehnici de biologie moleculară, cum ar fi Western blot și citometria în flux, țintele și căile de semnalizare ale medicamentelor pot fi dezvăluite în continuare. În evaluarea siguranței medicamentelor, testul MTT poate fi utilizat pentru a evalua efectele toxice ale medicamentelor asupra celulelor. Măsurând modificările valorii DO ale celulelor după tratamentul medicamentos, este posibil să se determine dacă medicamentul are citotoxicitate și puterea toxicității. Acest lucru este de mare importanță pentru ghidarea cercetării preclinice și a aplicării clinice a medicamentelor.

Aplicarea MTT în alte domenii

 

În cercetarea imunologică, testul MTT poate fi utilizat pentru a determina capacitatea de proliferare a limfocitelor. Prin co-incubarea limfocitelor cu antigeni sau imunostimulatori și măsurarea modificărilor activității celulare folosind testul MTT, capacitatea de răspuns imun a limfocitelor poate fi evaluată. Această metodă are aplicații largi în dezvoltarea de vaccinuri, imunoterapie și alte domenii. În cercetarea oncologică, testul MTT poate fi utilizat pentru a determina activitatea de proliferare și sensibilitatea la medicamente a celulelor tumorale. Prin compararea modificărilor valorilor DO ale celulelor tumorale în diferite condiții de tratament medicamentos, moleculele medicamentoase cu efecte inhibitoare asupra celulelor tumorale pot fi analizate și pot fi evaluate efectele lor anti-tumorale. Acest lucru este de mare importanță pentru ghidarea tratamentului clinic al tumorilor. În cercetarea toxicologiei mediului, testul MTT poate fi utilizat pentru a evalua efectele toxice ale poluanților de mediu asupra celulelor. Prin co-incubarea celulelor cu diferite concentrații de poluanți și măsurarea modificărilor activității celulare folosind testul MTT, se pot determina toxicitatea și mecanismul de acțiune al poluanților. Acest lucru este de mare importanță pentru evaluarea riscurilor ecologice ale poluanților de mediu și formularea politicilor de protecție a mediului. 

Etapele experimentale alealbastru de tiazolilmetodă:

1: Tripsina digeră celulele în fază logaritmică, centrifugează și le colectează după terminare pentru a face suspensie celulară și își ajustează concentrația la 5-10 prin numărul de celule × 104/ml. Pentru începători, este necesar ca celulele să ajungă la 5-10 × 104/ml adesea nu știe de unde să înceapă. Sunt aici pentru a vă oferi o metodă simplă de a determina inițial numărul de celule.

Luați ca exemplu 25 cm2 utilizate în mod obișnuit pentru cultura celulară:

1) Densitatea celulelor este de aproximativ 80% ~ 90% (figura de mai jos arată starea aproximativă a celulelor la 80% ~ 90% densitate). După digestie și centrifugare, îndepărtați supernatantul și adăugați 3 ml de mediu pentru a-l amesteca.

2) Luați un tub de centrifugă steril de 15 ml nou (pentru următorul pas de inoculare a plăcii cu 96 de godeuri) și umpleți-l cu aproximativ 9 ml de mediu

3) Luați 1 ml din suspensia celulară de 3 ml preparată în prima etapă, adăugați-o în tubul superior și numărați celulele după amestecare. În acest moment, este, în general, 5-10 sau mai puțin × 104/ml, ceea ce este echivalent cu 5-10 celule per celulă în 4 celule ale plăcii de numărare a celulelor (a se vedea figura de mai jos); Dacă concentrația nu este suficientă, suspensia celulară se adaugă în funcție de rezultatul numărării și fiecare picătură se calculează ca 50ul.

4) Numărul de celule trebuie ajustat în funcție de diferitele scopuri ale experimentului. De exemplu, în experimentul general de proliferare celulară, pot fi utilizate 2000 de celule per godeu (echivalent cu densitatea suspensiei celulare de 2 × 104/ml), 5000 până la 10000 celule per godeu (echivalent cu densitatea suspensiei celulare de 5 × 104/ml). În plus, numărul de celule ar trebui, de asemenea, determinat în funcție de propriile caracteristici, cum ar fi viteza de creștere. De exemplu, densitatea celulelor care cresc mai repede poate fi puțin mai mică.

2. După pregătirea suspensiei de celule, amestecați-o ușor și adăugați 100ul în fiecare gaură, astfel încât densitatea celulelor de testat să fie de 5000-10000/gaura (gaura de margine este umplută cu PBS steril).

L Notă: Deoarece celulele vor continua să se stabilească după amestecare, este necesar să se amestece în mod repetat în timpul procesului de inoculare, cum ar fi amestecarea o dată la șase găuri, pentru a se asigura că densitatea celulară a inoculării este exact aceeași între găuri, ceea ce este crucial pentru rezultatele MTT.

3. Puneți placa de cultură celulară inoculată în incubator pentru cultivare până când monostratul celular este acoperit cu fundul găurii (placă plată cu 96 de găuri) și adăugați medicamentul cu gradient de concentrație. În principiu, medicamentul poate fi adăugat după ce celula este atașată de perete, sau două ore, sau jumătate de zi, dar de multe ori adăugăm medicamentul în după-amiaza zilei precedente și a doua zi dimineața. În general, sunt setate 5-7 gradienți, 100ul per gaură și 3-5 găuri multiple. Este recomandat să setați 6, altfel este dificil să reflectați situația reală. Următoarea figură poate fi folosită ca pas de referință pentru placa cu 96 de găuri.

L Pentru dozare, unii oameni adaugă direct medicamente în plăci cu 96 de godeuri cu volume diferite pentru a forma un gradient de concentrație. Dar cred că ar trebui să încercăm să amestecăm diferite concentrații de medicamente în tubul EP, apoi să scoatem supernatantul de cultură din placa cu 96 de godeuri (care poate fi aspirată cu un pistol de descărcare) și să adăugăm 100 ul de mediu de cultură care conține diferite concentrații de medicamente, ceea ce poate asigura acuratețea concentrației medicamentului. În plus, trebuie remarcat faptul că, dacă se utilizează această metodă, nu aspirați toată soluția de cultură a plăcii cu 96 de godeuri înainte de a adăuga medicament. Ar trebui să adăugați probe imediat după ce ați aspirat o parte din el pentru a evita moartea celulelor din cauza uscării plăcii cu 96 de godeuri.

Se incubează cu 4,5% CO2 la 37 de grade timp de 16-48 de ore și se observă efectul medicamentului la microscopul inversat. Următoarea figură prezintă un gradient tipic de citotoxicitate a medicamentului.

4. Adăugați 10 ul de soluție MTT (5 mg/ml, adică . 0.5% MTT) în fiecare godeu și continuați cultivarea timp de 4 ore. Dacă medicamentul poate reacționa cualbastru de tiazolilsoluția de cultură poate fi aruncată după centrifugare, iar soluția de cultură care conține MTT poate fi adăugată după ce a fost spălată cu PBS de 2-3 ori.

5. Opriți cultura și pregătiți pentru dizolvare și cristalizare.

Albastru de tiazolil, al cărui nume chinezesc este albastru de metil, este un compus organic important care este utilizat pe scară largă în medicină, biologie și chimie. în medicină, este adesea folosit pentru a trata otrăvirea cu nitriți, otrăvirea cu cianuri etc. și este, de asemenea, utilizat în diagnosticul și tratamentul adjuvant al unor boli; În cercetarea biologică, poate fi folosit ca agent de colorare pentru etichetarea celulelor sau țesuturilor. Cu toate acestea, la fel ca multe medicamente, albastrul de metilen poate avea, de asemenea, o serie de efecte secundare în timpul utilizării:

Efecte secundare ale sistemului digestiv

Greața și vărsăturile sunt unul dintre efectele secundare comune ale albastrului de metilen în sistemul digestiv. Când albastrul de metilen intră în organism, poate stimula mucoasa gastrointestinală, provocând greață și chiar vărsături în cazurile severe. Acest simptom este mai pronunțat atunci când viteza de injectare intravenoasă este prea mare sau doza este prea mare. De exemplu, în unele cazuri clinice, pacienții pot prezenta greață și vărsături semnificative la scurt timp după injectarea intravenoasă rapidă de albastru de metilen, ceea ce le afectează confortul și experiența de tratament. Unii pacienți pot prezenta dureri abdominale după ce au folosit albastru de metilen, iar gradul de durere poate varia în funcție de diferențele individuale, variind de la disconfort ușor până la dureri mai severe.

În același timp, poate fi însoțită și de diaree, care se poate datora interferenței albastrului de metilen asupra peristaltismului intestinal și a funcției digestive, ducând la mișcarea intestinală anormală și la modificări ale secreției lichidului digestiv. Apariția pe termen lung sau frecventă a durerilor abdominale și a diareei nu afectează numai absorbția de nutrienți a pacientului și poate duce și la alte complicații fizice.

Efecte secundare ale sistemului urinar

După utilizarea albastrului de metilen, culoarea urinei va deveni albastră, ceea ce este cauzat de excreția de albastru de metilen și metaboliții săi în urină prin rinichi. În general, această schimbare a culorii urinei este temporară și nu va avea un impact grav asupra sănătății fizice. Dar, în unele cazuri speciale, cum ar fi pacienții cu boli ale sistemului urinar, modificările culorii urinei pot interfera cu diagnosticul bolii, iar medicii trebuie să efectueze o analiză cuprinzătoare pe baza altor indicatori de examinare. În timpul urinării, unii pacienți pot simți o senzație de usturime la deschiderea uretrei.

 

Acest lucru se poate datora efectului stimulator al albastrului de metilen asupra mucoasei uretrale, mai ales atunci cand concentratia de urina este mare sau mucoasa uretrala este frecata in timpul urinarii, senzatia de usturime va fi mai pronuntata. Acest simptom poate provoca un anumit disconfort pacienților și le poate afecta viața de zi cu zi.

Efecte secundare neurologice

Amețelile și durerile de cap sunt efecte secundare neurologice comune ale albastrului de metilen. După utilizarea albastrului de metilen, pacienții se pot simți amețiți și dezorientați în cap sau pot experimenta disconfort, cum ar fi umflarea și durerea capului. Acest simptom poate afecta atenția și capacitatea de gândire a pacientului și poate reduce eficiența muncii și a vieții. Apariția amețelilor și a durerilor de cap poate fi legată de efectele albastrului de metilen asupra vaselor de sânge și a nervilor din creier, iar mecanismul specific necesită încă cercetări suplimentare. În cazuri rare, albastrul de metilen poate provoca tulburări de conștiență, cum ar fi somnolență, comă etc.

Acest lucru se datorează, de obicei, utilizării excesive a albastrului de metilen sau pacienților care sunt prea sensibili la medicament, provocând inhibarea severă a sistemului nervos central. Tulburările de conștiență sunt un efect secundar grav care poate pune în pericol siguranța vieții pacientului și necesită tratament de salvare imediat.

1. Care este utilizarea bromurii de tetrazoliu albastru de tiazolil?

Albastru de tiazolil Albastru de tetrazoliu (MTT) poate fi utilizat în măsurarea proliferării celulare. MTT produce o soluție gălbuie care este transformată în formazan MTT albastru închis,-insolubil în apă de către dehidrogenazele mitocondriale ale celulelor vii.

2. Este sigur de depozitat Thiazolyl Blue?

Condiții de temperatură: sigilați pulberea și păstrați-o într-un frigider la -20 de grade pentru conservarea înghețului, ceea ce poate prelungi în mod eficient durata de valabilitate (de obicei, 1-2 ani); pentru depozitare pe termen scurt (în termen de 1 lună), poate fi păstrat temporar în condiții de refrigerare de 4 grade.

Cerințe rezistente la-lumină și la-umiditate: pulberea MTT este sensibilă la-lumină și trebuie păstrată în sticle maro de reactivi sau sticle transparente învelite cu folie de staniu. Între timp, ar trebui adăugați agenți de uscare (de exemplu, silicagel) pentru a preveni absorbția umezelii și aglomerarea pudrei.

3. Se va schimba culoarea Thiazolyl Blue?

Când soluția prezintă un precipitat albastru violet sau se închide la culoare, indică faptul că a fost oxidată și nu poate fi folosită în continuare.
Evitați plasarea soluției la temperatura camerei sau într-un mediu ușor, deoarece poate eșua rapid.

Tag-uri populare: albastru de tiazolil cas 298-93-1, furnizori, producători, fabrică, en-gros, cumpărare, preț, vrac, de vânzare