Liraglutide Powder CAS 204656-20-2

Pulbere liraglutidă, Formula moleculară C172H265N43O51, CAS 204656-20-2, Greutate moleculară 1209.40. Este un glucagon uman acilat sintetizat artificial, cum ar fi peptida-1 (GLP-1) analog cu peste 97% asemănare a secvenței în comparație cu GLP-1 natural. Poate fi dizolvat în apă, etanol și propilenglicol. A 34-a poziție lizină a moleculei Natural GLP-1 este înlocuită de arginină, care nu numai că păstrează și prelungește timpul de legare între produsele de acilare și proteine, dar depășește în mod semnificativ dezavantajul degradării ușoare a GLP. În condiții normale de depozitare, prezintă o stabilitate bună, iar soluția sa apoasă poate menține stabilitatea fizică și chimică timp de cel puțin 2 ani.

Toxicitate genetică: rezultatele testului AME pentruPulbere liraglutidă, Testul de aberație cromozomială pentru limfocitele din sângele periferic uman și testul de micronucleu de șobolan au fost negative.

Toxicitate reproductivă:

1. Șobolanii masculi au fost injectați subcutanat cu 0,1, 0,25 și 1,0 mg/kg/d de liraglutidă cu 4 săptămâni înainte de împerechere și în timpul împerecherii. La o doză de 1,0 mg/kg/d, fertilitatea animalelor masculine nu a fost direct afectată. Conform calculelor ASC plasmatice, expunerea sistemică generată de această doză a fost de aproximativ 11 ori mai mare decât a expunerii umane la doza umană maximă recomandată (MRHD). Injecția subcutanată de 1,0 mg/kg la șobolani de sex feminin a dus la creșterea morții embrionare precoce, a creșterii în greutate vizibilă și a scăderii aportului alimentar.

2. De la 2 săptămâni înainte de împerecherea până la a 17 -a zi de sarcină la șobolani de sex feminin, au fost administrate injecții subcutanate de 0,1, 0,25 și 1,0 mg/kg/d de liraglutidă. Conform calculelor ASC plasmatice, expunerea sistemică generată de aceste trei doze a fost de aproximativ 0,8, 3 și de 11 ori cea a expunerii umane în cadrul MRHD, respectiv. În grupul de doză de 1mg/kg/d, a existat o ușoară creștere a numărului de decese embrionare timpurii. La toate dozele, au fost observate anomalii fetale, variații renale și vasculare, osificarea neregulată a craniului și o stare completă de osificare excesivă. La o doză de 1,0 mg/kg/d, s -au observat ficatul reperat și o ușoară răsucire a coastei. Incidența malformațiilor fetale care depășesc aceeași perioadă și controlul istoric este: malformații orofaringiene și/sau stenoză la deschiderea gâtului la o doză de 01mg/kg/d și defecte ombilicale în doze de 0,1 și 0,25 mg/kg/d.

În a 6 -a până la a 18 -a zi de sarcină, iepurii au fost injectați subcutanți cu liraglutidă la concentrații de 0,01, 0,025 și 0,05 mg/kg/d. Conform calculelor ASC plasmatice, expunerea sistemică a iepurilor însărcinate a fost mai mică decât cea a oamenilor în timpul MRHD. În toate dozele, greutatea fetală a scăzut și incidența generală a anomaliilor fetale severe a crescut într-o manieră dependentă de doză. At doses of 0.01mg/kg/d (kidney, shoulder and spleen bones),>=0.01mg/kg/d (eyes and forelimbs), 0.025mg/kg/d (brain, tail and vertebrae, large blood vessels and heart, umbilical cord),>=0.025mg/kg/d (sternum), and 0,05 mg/kg/d (os parietal și vase mari de sânge), incidența malformațiilor a depășit -o pe cea a controalelor contemporane și istorice. Osificarea neregulată și/sau anomalii scheletice se găsesc în craniu și guler, vertebre și coaste, sternă, pelvis, coccis și oase de umăr și splină; Există, de asemenea, o ușoară variație scheletică dependentă de doză vizibilă. Anomalii viscerale se găsesc în vasele de sânge, plămâni, ficat și esofag. Toate grupurile de tratament au prezentat lobi dubli sau bifurcații ale vezicii biliare, dar nu a fost observată nicio situație similară în grupul de control.

4. În perioada 6 din ziua 6 de sarcină până la înțărcarea sau încetarea lactației în ziua 24, șobolanii de sex feminin au fost injectați subcutanat cu 0,1, 0,25 și 1,0 mg/kg/d de liraglutidă. Conform calculelor ASC plasmatice, expunerea sistemică a fost de aproximativ 0,8, 3 și de 11 ori mai mare decât expunerea umană în timpul MRHD. Perioada de livrare a majorității animalelor din grupul de tratament a fost ușor întârziată. Greutatea medie a nou -născuților din grupul de tratament a fost mai mică decât cea din grupul de control. Șobolanii de sex feminin din grupul de doză de 1,0 mg/kg/d au prezentat pierderi de sânge și comportament de emoție în timpul nașterii. Greutatea corporală medie a șobolanilor de descendenți F2 din grupul de tratament de la naștere până la a 14 -a zi după naștere a fost mai mică decât cea a grupului de control, dar diferențele dintre grupuri nu au atins o semnificație statistică.

Pulbere liraglutidăeste un glucagon uman acilat sintetizat artificial, cum ar fi peptida-1 (GLP-1) analog cu o asemănare a secvenței de peste 97% comparativ cu GLP-1 natural. Structura moleculară a liraglutidei include următoarele caracteristici principale: a 34-a poziție lizină a moleculei naturale GLP-1 este înlocuită de arginină, care nu numai că păstrează și prelungește timpul de legare între produsele de acilare și proteine, dar, de asemenea, depășește semnificativ dezavantajul degradării ușoare a GLP; Un lanț lateral suplimentar de acid gras a fost adăugat la cea de-a 26-a lizină, care ajută la prelungirea timpului de înjumătățire a produselor de acilare in vivo. Aceste modificări moleculare unice au făcut ca Delilaglutide să apară efecte deosebite în tratamentul clinic, în special în diabet și pierderea în greutate.

Metodele chimice pentru sintetizarea liraglutidei includ în principal următorii pași:

1. Sinteza fragmentului

În primul rând, împărțiți întreaga liraglutidă în mai multe segmente, care pot fi, în general, împărțite în cinci segmente: aminoacizi 1 până la 4, aminoacizi de la 5 la al 10 -lea, aminoacizi de la 11 la 16, aminoacizi 17 - 24 și 25 - 31 de aminoacizi. Fiecare fragment este sintetizat separat, ceea ce poate reduce dificultatea și costul sintezei peptidelor și poate îmbunătăți eficiența sintezei.

Pentru sinteza fiecărui fragment, în general se utilizează sinteză în fază solidă sau metode de sinteză în fază lichidă. Metoda de sinteză în fază solidă implică conectarea grupărilor carboxilice de aminoacizi la rășină, apoi adăugarea secvențială a aminoacizilor la rășină în secvență și, în final, tăierea peptidelor din rășină. Metoda de sinteză a fazei lichide implică dizolvarea tuturor aminoacizilor dintr-un solvent organic și apoi condensarea acestora în secvență pentru a forma fragmente de peptide.

2. Reacția de cuplare

Efectuați reacția de cuplare pe cele 5 fragmente peptidice sintetizate la pasul 1 pentru a forma o liraglutidă completă. Reacția de cuplare poate fi realizată folosind agenți de cuplare chimici sau biologici, iar metoda specifică poate fi selectată în funcție de nevoile reale.

În reacția de cuplare, este necesar să conectați grupul amino al fiecărui fragment cu grupa carboxil a următorului fragment. Pentru a realiza acest lucru, este de obicei necesar să se utilizeze agenți de condensare, cum ar fi DIC sau BOP. Acești agenți de condensare pot promova reacția dintre grupele amino și carboxil, formând legături peptidice. În reacția de cuplare, ar trebui să se acorde atenție și controlului condițiilor de reacție, cum ar fi temperatura, valoarea pH -ului și timpul de reacție, pentru a asigura progresul lină al reacției.

3. Purificare și identificare

Liraglutida sintetizată trebuie purificată și identificată pentru a asigura puritatea și calitatea produsului. Purificarea este de obicei efectuată folosind metode precum cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) sau electroforeză, urmată de identificare folosind spectrometrie de masă, rezonanță magnetică nucleară și alte metode. Prin aceste mijloace, se poate asigura că greutatea moleculară și secvența produsului sintetizat sunt în concordanță cu așteptările și nu există impurități sau reziduuri de produse secundare.

4. Alte modificări

În plus față de etapele de mai sus, uneori sunt necesare alte modificări, cum ar fi adăugarea sau eliminarea grupurilor de protecție. Acești pași sunt, de asemenea, esențiali, deoarece pot proteja grupurile active din peptide de a fi distruse sau apar reacții laterale, îmbunătățind calitatea și randamentul sintetizatPulbere liraglutidă.

Cele de mai sus sunt principalele metode chimice pentru sintetizarea liraglutidei, dar, desigur, unele detalii și tehnici trebuie menționate în funcționare practică. De exemplu, selectarea sistemului de solvent adecvat, controlul temperaturii și pH -ului și utilizarea catalizatorilor adecvați poate afecta toate eficiența sintezei și calitatea produsului. Prin urmare, în funcționare practică, ajustările și optimizările trebuie făcute în funcție de circumstanțe specifice.

Liraglutida (un agonist al receptorului GLP-1 cu acțiune lungă) joacă un rol semnificativ în tratamentul diabetului. Pentru a -și asigura controlabilitatea calității, este necesar să se stabilească metode analitice științifice și riguroase și să se efectueze o validare sistematică pentru a asigura fiabilitatea acestor metode. Următoarea analiză este realizată din trei aspecte: elemente de validare, metode de validare și puncte de control cheie.

Elemente de verificare de bază și cerințe tehnice

Specificitate

Obiectiv: Pentru a demonstra că metoda poate distinge liraglutida de impurități, produse de degradare și excipienți.

Strategie de implementare:

Cromatografie: Utilizați HPLC-UV sau UPLC-MS. Prin teste de degradare forțată (cum ar fi temperatura ridicată, expunerea la lumină, hidroliza acid-bază), generează produse de degradare și verifică gradul de separare al vârfului principal și vârful impurității (mai mare sau egal cu 1,5). De exemplu, în studiul modelului apoE-/- șoarece, după ce liraglutida este oxidată, produsele de degradare (cum ar fi aductele de acid formic) trebuie să fie confirmate prin analiza cromatografică pentru a asigura efectul de separare al produselor de degradare din vârful principal.

Spectroscopie: Utilizați un detector PDA pentru a compara spectrele UV ale vârfului și impurităților principale și confirmați puritatea vârfurilor.

Control gol: Verificați absența semnalelor false pozitive folosind probe fără liraglutide (cum ar fi soluții excipiente).

 

Precizie

Obiectiv: Pentru a se asigura că rezultatele măsurate sunt apropiate de valoarea adevărată și rata de recuperare este controlată în 98% - 102%.

Strategie de implementare:

Test de recuperare standard pentru adăugare: adăugați o cantitate cunoscută de substanță de referință la un eșantion cu conținut de liraglutidă cunoscut și măsurați rata de recuperare. De exemplu, în analiza formulării, adăugați 0,5 mg/ml, 1,0 mg/ml și 1,5 mg/ml liraglutidă la soluția excipientă goală, repetați fiecare concentrație de 3 ori și calculați rata medie de recuperare.

Metoda de comparație: comparați cu metodele clasice (cum ar fi titrarea) sau metodele verificate (cum ar fi metodele de farmacopee), iar abaterea rezultatelor ar trebui să fie mai mică sau egală cu 2%.

 

Precizie

Obiectiv: Evaluarea gradului de apropiere a rezultatelor de măsurare repetate, cu RSD mai puțin sau egal cu 2%.

Strategie de implementare:

Repetabilitate: efectuați 6 măsurători consecutive ale aceluiași eșantion de către același analist, același instrument și același lot de probe și calculați RSD.

Precizie intermediară: calculați RSD determinând același lot de eșantioane de către analiști diferiți, instrumente diferite și date diferite. De exemplu, în determinarea conținutului de liraglutidă, repetabilitatea RSD ar trebui să fie mai mică sau egală cu 1,5%, iar RSD de precizie intermediară ar trebui să fie mai mică sau egală cu 2,0%.

Reproductibilitate: Verificarea colaborativă de către mai multe laboratoare (cum ar fi metodele standard de farmacopeie), RSD ar trebui să respecte principiile de orientare.

 

Limita de detectare și limita de cuantificare

Obiectiv: Pentru a determina concentrația minimă pe care metoda o poate detecta și cuantifica liraglutida.

Strategie de implementare:

Metoda raportului semnal-zgomot: Determinați LOD cu un raport semnal-3: 1 și determinați LOQ cu un raport semnal-zgomot 10: 1. De exemplu, în metoda HPLC-UV, LOD-ul liraglutidei poate fi de până la 0,01 ug/ml, iar LOQ este 0,05 ug/ml.

Metoda curbei standard: calculați LOD și LOQ folosind semnalele de răspuns ale substanțelor standard cu concentrare scăzută (cum ar fi 0,1 ug/ml - 1 ug/ml).

 

Liniaritate

Obiectiv: Pentru a demonstra că semnalul de răspuns este proporțional cu concentrația, cu R² mai mare sau egal cu 0,999.

Strategie de implementare:

Test de concentrare a gradientului: Pregătiți 5-7 gradienți de concentrație (cum ar fi 0,1 mg/ml - 2.0 mg/ml) de soluții standard, măsurați zona de vârf sau valoarea de răspuns și desenați curba standard.

Analiza reziduală: verificați dacă reziduurile sunt distribuite aleatoriu și nu există o abatere sistematică.

 

Gamă

Obiectiv: Pentru a determina intervalul de concentrație aplicabil al metodei, de obicei 120% din LOQ la limita superioară a liniarității.

Strategie de implementare:

Determinarea conținutului: Intervalul este setat la 80% - 120% din suma etichetată. De exemplu, intervalul de determinare a conținutului de formulare liraglutide ar trebui să fie de 0,4 mg/ml - 1.2 mg/ml. Controlul impurității: Conform ghidului ICH Q3D, setați intervalul limită de impurități (de exemplu, impuritate unică mai mică sau egală cu 0,5%, impuritate totală mai mică sau egală cu 2,0%).

Documente de validare și gestionarea datelor

01

Plan și raport de validare

Definiți clar elementele de validare, metodele, standardele de acceptare și procedurile anormale de manipulare. De exemplu, dacă Precision RSD depășește limita, este necesar să se investigheze defecțiunile instrumentului sau erorile operaționale.

Înregistrați datele originale (cum ar fi cromatogramele, curbele standard, tabelele de calcul ale ratei de recuperare) pentru a asigura trasabilitatea.

02

Dezvoltarea metodei de indicare a stabilității

Pentru teste de degradare obligatorie, acesta ar trebui să acopere oxidarea, expunerea la lumină, hidroliza etc., pentru a simula condițiile reale de depozitare. De exemplu, liraglutida a fost plasată la 60 de grade timp de 48 de ore, rata de degradare ar trebui să fie mai mare sau egală cu 10% pentru a verifica capacitatea metodei de a detecta produsele de degradare.

03

Conformitatea de reglementare

Urmați ICH Q2 (R2), USP<1225>și orientări GMP chinezești pentru a se asigura că elementele de validare acoperă indicatori de bază, cum ar fi specificitatea și precizia.

Pentru analiza impurității elementare, ar trebui să respecte ICH Q3D și USP<233>Cerințe, controlând limitele elementelor de 1 clasă, cum ar fi, CD și PB.

Tag-uri populare: Liraglutide Powder CAS 204656-20-2, furnizori, producători, fabrică, en-gros, cumpărare, preț, vrac, de vânzare